钙非依赖性磷脂酶A2对人非酒精性脂肪性肝病细胞中甘油3-磷酸脱氢酶表达的影响

作者：陈颖; 施红波^*; 乐玮琳; 唐琼妮

来源：中华肝脏病杂志, 2023, 31(10).

• 非酒精性脂肪性肝病
• 钙非依赖性磷脂酶A2
• 甘油3-磷酸脱氢酶
• 非酒精性脂肪性肝病细胞

目的探讨钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)在人非酒精性脂肪性肝病细胞中对线粒体甘油3-磷酸脱氢酶(mGPDH)表达的影响。方法体外用油酸诱导THLE-2细胞脂质沉积, 构建非酒精性脂肪性肝病细胞模型。同时运用甘油三酯试剂盒、定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测不同诱导时期(0、24、48、72 h)细胞内甘油三酯含量、iPLA2及mGPDH的表达水平。在模型细胞中分别加入iPLA2抑制剂溴烯醇内酯和活性氧(ROS)抑制剂N-乙酰半胱氨酸, 继续培养24、48 h后收集细胞, 检测细胞内mGPDH的mRNA和蛋白的表达水平。采用t检验、单因素方差分析、直线相关分析法进行统计学分析。结果随着油酸作用THLE-2细胞时间的延长, 细胞内甘油三酯含量逐渐增加(P < 0.01), mGPDH mRNA及蛋白表达量降低(P < 0.01), iPLA2 mRNA及蛋白表达量增加(P < 0.01)。并且mGPDH mRNA表达水平与iPLA2 mRNA水平呈负相关(r = -0.878, P = 0.002)。iPLA2抑制剂组和ROS抑制剂组中mGPDH mRNA和蛋白表达量较模型对照组增加(P值均< 0.01)。iPLA2抑制剂组中24 h mGPDH mRNA表达量较48 h增加(P < 0.01)。ROS抑制剂组中mGPDH mRNA表达量随抑制剂作用时间的延长而逐渐增加(P < 0.01)。2个抑制剂组比较, ROS抑制剂组mGPDH mRNA增加较iPLA2抑制剂组明显, 差异有统计学意义(P < 0.01)。结论非酒精性脂肪性肝病细胞中iPLA2在一定程度上可抑制mGPDH的表达。

• 单位
  宁波市医疗中心李惠利医院