下调DNA损伤激活的长链非编码RNA抗心房颤动大鼠心肌纤维化的机制研究

作者：杨淑玲^*; 谷云飞; 杨定宪; 高爱玲; 尚伟; 陈滢伊; 张光

来源：中国循环杂志, 2022, 37(06): 639-646.

• 心房颤动
• DNA损伤激活的长链非编码RNA
• 心肌纤维化
• p38丝裂原激活的蛋白激酶
• 核因子κB p65

目的：探究下调DNA损伤激活的长链非编码RNA(lncRNA NORAD)抗心房颤动（房颤）大鼠心肌纤维化作用及可能的作用机制。方法：SD大鼠随机分为对照组、房颤组、重组腺相关病毒血清型9阴性对照（rAAV9-NC）组、重组腺相关病毒血清型9载体含用于沉默lncRNA NORAD的小干扰RNA(rAAV9-siNORAD)组、p38丝裂原激活的蛋白激酶（p38MAPK）抑制剂SB203580组、rAAV9-siNORAD+SB203580组，每组8只。建立各组模型大鼠并进行对应干预措施，实验结束后对大鼠进行心电图测试，记录房颤的发生率和持续时间；并检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平；Masson染色检测心房组织纤维化，计算心房胶原容积分数（CVF）；实时荧光定量PCR检测心房组织lncRNA NORAD、Ⅰ型胶原（COL1-A1）和Ⅲ型胶原（COL3-A1）的mRNA表达情况；Western blot检测心房组织丝裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)、p38MAPK和核因子κB p65(NF-κB p65)及其磷酸化蛋白的表达情况。结果：与对照组相比，房颤组大鼠可观察到P波消失，出现大小不等、不规则的f波，心房组织有明显的纤维化改变，CVF、血清c TnI、CK-MB、TNF-α、IL-6水平、心房组织COL1-A1和COL3-A1的mRNA水平以及lncRNA NORAD表达水平、MKK6蛋白水平、磷酸化p38 MAPK与p38 MAPK的比值和磷酸化NF-κB p65与NF-κB p65比值升高，差异具有统计学意义（P均<0.05）；与房颤组相比，rAAV9-siNORAD组和SB203580组大鼠房颤的发生率降低，持续时间缩短（P<0.05）,CVF，血清cTnI、CK-MB、TNF-α、IL-6水平，心房组织COL1-A1和COL3-A1的mRNA水平以及lncRNA NORAD表达水平、MKK6蛋白水平、磷酸化p38 MAPK与p38 MAPK的比值及磷酸化NF-κB p65与NF-κB p65的比值降低，差异均具有统计学意义（P均<0.05）；分别与单用SB203580和r AAV9-siNORAD相比，两者联合应用后p38 MAPK/NF-κB p65信号通路的激活被进一步抑制，心肌纤维化程度进一步降低。结论：下调lncRNA NORAD可能通过抑制p38 MAPK/NF-κB p65信号通路激活对房颤大鼠发挥抗心肌纤维化作用。

• 单位
  焦作市人民医院