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摘要
目的:应用高浓度反复间歇法建立人肺腺癌A549培美曲塞耐药细胞株A549/PEM,探讨PTEN、m TOR在人肺腺癌亲本株A549及培美曲塞诱导人肺腺癌耐药株A549/PEM中的表达变化。方法:采用终浓度为500ng/ml的培美曲塞反复间歇冲击建立人肺腺癌A549培美曲塞耐药细胞株A549/PEM,MTT法检测细胞耐药性。RT-PCR、Western blot分别检测PTEN、m TOR在A549及A549/PEM细胞的mRNA及蛋白表达变化。结果:A549/PEM耐药指数为26.87±1.81,较亲本株A549升高约27倍。RT-PCR检测mRNA表达示A549/PEM的PTEN及m TOR基因表达与A549相比均表达上调(P=0.023;P<0.01);Western blot检测蛋白表达示A549/PEM的PTEN及m TOR蛋白表达与A549相比均表达上调(P<0.01;P=0.04)。结论:高浓度反复间歇法可成功建立人肺腺癌A549培美曲塞耐药细胞株模型;PTEN、m TOR表达变化可能与培美曲塞获得性耐药相关。
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