摘要

目的研究SMAD4新突变体对胰腺导管腺癌(PDAC)发生发展的影响。方法将构建好的空白对照组(NC组)、野生型组(SMAD4wt组)、突变型组(SMAD4Y353C组)3组质粒用TransIntroTM EL转染试剂分别导入PDAC细胞PANC-1中,首先进行实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western Blot实验,分析不同质粒对PDAC细胞mRNA和蛋白质表达的影响,然后进行伤口愈合实验和细胞侵袭实验,研究不同质粒对PDAC细胞PANC-1伤口愈合和侵袭能力的影响。结果 RT-qPCR和Western Blot检测结果显示,NC组、SMAD4wt组、SMAD4Y353C组PDAC细胞PANC-1SMAD4 mRNA和蛋白表达量比较差异均有统计学意义(F=695.76、194.98,P<0.05),而且SMAD4Y353C组mRNA和蛋白表达量均低于SMAD4wt组,高于NC组,差异均有显著性(P<0.05)。体外伤口愈合实验和细胞侵袭实验结果显示,NC组、SMAD4wt组和SMAD4Y353C组细胞的迁移面积和侵袭能力比较差异有统计学意义(F=1 741.15、299.12,P<0.05),SMAD4Y353C组细胞的迁移面积和侵袭能力明显大于SMAD4wt组细胞,小于NC组细胞,差异均有显著意义(P<0.05)。结论突变型SMAD4Y353C能抑制PANC-1细胞SMAD4mRNA和蛋白质的表达,促进PANC-1细胞的迁移和侵袭,为PDAC的治疗提供理论依据。

  • 单位
    青岛大学附属医院

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