BDNF基因表达水平对肝癌细胞97-H增殖和迁移影响机制探讨

作者：郭大伟; 周品一; 江宏伟; 初晨; 赵旭鹏; 周勇

来源：中华肿瘤防治杂志, 2017, 24(21): 1501-1506.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2017.21.003

• BDNF AS
• BDNF
• 肝癌细胞
• 增殖
• 迁移

目的脑源性神经营养因子(brain-dervived neurotrophic factor,BDNF)促进肿瘤细胞的生长和转移,反义BDNF(antisense BDNF)是BDNF基因的内源性反义长链非编码RNA,对BDNF表达水平具有调控作用。本研究旨在探讨BDNF AS对肝癌细胞97-H增殖和迁移的作用,以及对BDNF表达水平的影响。方法采用BDNF AS质粒瞬时转染肝癌细胞系97-H,采用qPCR方法检测肝癌细胞中BDNF AS和BDNF mRNA水平,采用蛋白质印迹法检测BDNF蛋白表达水平,采用EdU掺入、划痕实验和Transwell小室研究转染BDNF AS对肝癌细胞增殖和迁移的影响。结果转染BDNF AS质粒的细胞中,BDNF AS水平显著上调,是对照组细胞的(136.97±7.92)倍(F=880.301,P<0.001),而BDNF mRNA和蛋白水平显著降低,分别是对照组细胞的(0.50±0.08)倍和(0.275±0.050)倍,F=59.435,P<0.001;F=566.528,P<0.001。转染BDNF AS细胞的EdU阳性率为(36.1±2.3)%,显著低于对照组细胞(F=40.833,P<0.001),而过表达BDNF AS的细胞经rhBDNF刺激后,细胞增殖百分比增加,P=0.001。BDNF AS转染组细胞的划痕愈合率以及迁移细胞数分别为(6.23±0.30)%和31.0±2.6,均低于对照组细胞(F=25.975,P=0.001;F=15.851,P=0.001),而过表达BDNF AS的细胞经rhBDNF刺激后,迁移细胞数增加,P=0.002。结论肝癌细胞97-H中BDNF AS可能通过下调BDNF mRNA和蛋白水平,实现对肝癌细胞生长、迁移的负性调控作用。

• 单位
  中国医科大学附属第四医院