促黄体激素释放激素-TAT-p53融合蛋白制备及其对肿瘤细胞增殖作用的影响

作者：马洪圆; 田园; 李泽鸿; 张国利; 吴广谋; 余晓颖; 陈云雨; 岳玉环

来源：中国生物制品学杂志, 2019, (08): 848-852.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.002716

• 促黄体激素释放激素
• TAT蛋白
• p53基因
• 肿瘤增殖

目的 制备促黄体激素释放激素(luteinizing hormone releasing hormone,LHRH)-TAT-p53融合蛋白,探讨其抗肿瘤作用。方法 以重组质粒pET28a-p53为模板,经PCR扩增目的基因,双酶切,克隆至原核表达载体p ET20b中,构建重组表达质粒p ET20b-LHRH-TAT-p53,并在E. coli中IPTG诱导表达,经金属螯合层析、DEAE弱阴离子交换层析纯化目的蛋白。取对数生长期的HeLa、BGC及MDCK细胞进行细胞活性试验,检测pET28a-p53蛋白活性。结果 经双酶切及测序鉴定,重组质粒pET20b-LHRH-TAT-p53构建正确;融...

• 单位
  吉林农业大学; 皖南医学院