摘要
目的:探究微小RNA(mi R)-let-7b-5p靶向调控含LIM域2蛋白(LIMD2)对胃癌(GC)细胞间质-上皮转化(MET)的影响。方法:采用q RT-PCR检测GES-1、SCG-7901、MGC-803、BGC-823细胞中mi R-let-7b-5p相对表达水平;构建绿色荧光蛋白(GFP)和mi R-let-7b-5p稳定过表达细胞株,q RT-PCR法检测mi R-let-7b-5p过表达效率;生物信息学和双荧光素酶实验预测并验证mi R-let-7b-5p与LIMD2靶向关系;构建pcDNA5-LIMD2过表达载体,将细胞分为NC组、mi R-let-7b-5p组、mi R-let-7b-5p-pcDNA5组和mi R-let-7b-5p-LIMD2组,Western Blot检测各组细胞中LIMD2、Vimentin、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达;Transwell法检测mi R-let-7b-5p对MGC-803细胞侵袭能力的影响。结果 :与GES-1相比,SCG-7901、MGC-803、BGC-823细胞中mi R-let-7b-5p相对表达水平明显下降(P<0.05)。与NC组相比,mi R-let-7b-5p组mi R-let-7b-5p相对表达量升高(P<0.05),转染LIMD2-WT的细胞相对荧光素酶活性明显降低(P<0.05),LIMD2、Vimentin、N-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达上调(P<0.05),细胞侵袭个数减少(P<0.05)。与mi R-let-7b-5p组相比,mi R-let-7b-5p-LIMD2组LIMD2、Vimentin、N-cadherin蛋白表达上调(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),细胞侵袭个数增多(P<0.05)。结论:过表达mi R-let-7b-5p可靶向下调LIMD2促进胃癌细胞的MET,从而有效改善肿瘤细胞的侵袭。
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单位武汉市东西湖区人民医院