抗Caspase-12核酶的制备与体外活性鉴定

作者：姜山; 谢青; 张韡; 周霞秋; 俞红; 金由辛

来源：中华肝脏病杂志, 2005, (02): 47-50.

DOI：10.3760/j.issn:1007-3418.2005.02.011

• 核糖核酸酶
• 转录
• Caspase-12
• 活性鉴定 Ribozyme
• Transcription
• Caspase-12
• Identification of activity

目的 设计针对小鼠内质网应激凋亡途径中Caspase-12 mRNA的锤头状核酶(Rz138、Rz218),通过靶基因及核酶的体外转录、切割,进行核酶活性鉴定,评估其应用前景。 方法 小鼠Caspase-12基因的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增片段克隆于PGEM-T载体的T7启动子下游,通过α-32P UTP标记的体外转录物作为靶RNA。设计合成针对小鼠Caspase-12 mRNA的核酶,通过PCR方法扩增核酶的转录模板,采用非同位素标记法行体外转录,核酶与靶RNA进行体外切割实验。 结果 在37℃,Rz138、Rz218均有切割活性,Rz138的切割效率较高,几乎100％。 结论 ...

• 单位
  中国科学院