贝氏考克斯体毒力与毒力相关蛋白芯片的研制

作者：王锡乐; 温博海; 陈梅玲; 王君; 孙长俭; 杨晓

来源：军事医学科学院院刊, 2008, (02): 121-125.

DOI：10.3969/j.issn.1674-9960.2008.02.005

• 贝氏考克斯体
• 重组蛋白
• 蛋白芯片 Coxiella burnetii
• recombinant protein
• protein microarray

目的:构建贝氏考克斯体毒力与毒力相关蛋白芯片。方法:根据贝氏考克斯体全基因组序列,筛选出约160个编码毒力及毒力相关蛋白的基因,采用PCR扩增基因片段,将获得的基因片段与pET32a表达载体连接,然后将该重组质粒转化大肠杆菌并使目的基因表达,采用Ni-NTA亲和层析柱纯化表达的目的重组蛋白。将纯化的重组蛋白点在醛基化玻片上制备蛋白芯片。结果:由贝氏考克斯体104个重组蛋白构建毒力与毒力相关蛋白芯片,通过荧光扫描仪分析蛋白芯片与贝氏考克斯体感染的小鼠血清反应,发现10个重组蛋白与该血清反应为强阳性。结论:所制备的毒力与毒力相关蛋白芯片具有贝氏考克斯体特异性,可用于贝氏考克斯体感染患者血清的检测。

• 单位
  军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室