羰基还原酶突变体高选择性催化不对称还原大位阻羰基化合物

作者：梁晨; 聂尧^*; 徐岩

来源：高等学校化学学报, 2018, 39(11): 2438-2444.

• 羰基还原酶
• 2-氧代-4-苯基丁酸乙酯
• 苯甲酰基乙酸乙酯
• 1-苄基-3-吡咯烷酮
• 不对称转化

以立体选择性羰基还原酶(RCR)的双突变酶RCR-F285A/W286A为对象,考察了该突变酶对酮酯类和杂环酮类底物的催化性能(包括酶活力和动力学参数)及对映体选择性,发现其对2-氧代-4-苯基丁酸乙酯(OPBE)、苯甲酰基乙酸乙酯(EBA)和1-苄基-3-吡咯烷酮均具有酶活性,并且以高光学纯度生成相应手性醇(e.e.>99%).考察了反应条件对产率最高的OPBE的不对称转化反应的影响,结果表明,当pH=7. 0,反应温度30℃,3. 5%(体积分数)的异丙醇作助溶剂,加入1 g/L底物时,产率达到80. 3%.进一步通过分批补料减弱底物抑制作用,在10 g/L的底物浓度下,时空产率为0. 062 g·L-1·h-1,为酶法不对称合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯[(R)-HPBE]的工业应用提供了实验基础.

• 单位
  生物工程学院; 江南大学; 工业生物技术教育部重点实验室