摘要
目的 探究外排泵表达在多重耐药鲍曼不动杆菌多黏菌素B(PB)耐药中的作用。方法 收集宁波市医疗中心李惠利医院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌,检测其对PB的最低抑菌浓度(MIC);以经体外诱导耐药的PB耐药株为耐药组,未经诱导的相同菌株为敏感组,比较耐药组加入外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙(CCCP)前后的MIC变化。采用PCR法检测菌株中外排泵操纵子基因(adeB、adeJ、adeG、adeE、abeM)及调控基因(adeR、adeS、adeN和adeL)的携带率,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测两组外排泵基因表达水平,利用SnapGene软件对调控基因进行序列比对分析。结果 共收集到多重耐药鲍曼不动杆菌300株,所有菌株均对PB敏感,未检出PB耐药株。耐药组加入CCCP前后MIC值变化差异有统计学意义(P<0.01)。所有菌株外排泵操纵子基因adeB、adeJ、adeG和abeM的携带率均>90%,未检出adeE携带株。qRT-PCR结果显示,与敏感组相比,耐药组adeB表达量升高2.2倍(P<0.05),adeJ、adeG和abeM分别升高1.9倍、1.8倍和1.8倍(均P>0.05)。序列比对分析发现adeR(V120I、A136V)和adeS(A153T、G186V)有多个突变位点,adeN和adeL均未发现突变位点。结论 多重耐药鲍曼不动杆菌对PB耐药与外排泵操纵子基因的高表达有关,机制可能是调控基因adeR和adeS点突变引起下游基因adeB过表达所致。
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单位宁波市医疗中心李惠利医院