IQGAP1高表达抑制食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性

作者：李鑫婷; 孙雪娇; 李婷; 杨子怡; **程; 王正谦; 赵欣冉; 李晓钟; 王晓霞^*

来源：生命的化学, 2023, 43(01): 140-147.

DOI：10.13488/j.smhx.20220718

• IQGAP1
• 顺铂
• 化疗耐药
• 凋亡
• 食管鳞状细胞癌

本文旨在研究含IQ模序的GTP酶激活蛋白1(IQ motif containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)过表达或基因干扰是否影响食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性。质粒转染构建IQGAP1高表达和基因干扰的稳定细胞系，并采用Western blot进行鉴定。然后，采用不同浓度(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)的顺铂处理细胞，通过3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑噻唑蓝[3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法检测IQGAP1高表达、IQGAP1基因干扰和相应对照细胞的活力，通过4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-Diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色和流式细胞技术检测细胞凋亡率，Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果显示，IQGAP1高表达和基因干扰的稳定细胞系成功建立。在不同浓度的顺铂处理后，MTT结果表明，IQGAP1高表达细胞活力明显高于对照细胞(P<0.05)；而IQGAP1基因干扰细胞活力明显低于对照细胞(P<0.05)。DAPI染色和流式细胞检测结果显示，IQGAP1高表达细胞凋亡率明显低于对照细胞(P<0.05),IQGAP1基因干扰细胞凋亡率明显高于对照细胞(P<0.05)。Western blot结果表明，IQGAP1高表达细胞的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3酶原(pro-cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Procaspase-3)和多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)原带表达水平均高于对照细胞，裂解PARP(cleaved-PARP)的表达水平低于对照细胞，IQGAP1基因干扰细胞的Procaspase-3和PARP原带表达水平均低于对照细胞。研究结果表明，IQGAP1过表达影响凋亡抑制食管鳞癌细胞对顺铂的敏感性，提示IQGAP1过表达是导致顺铂在食管鳞癌细胞中产生耐药的重要机制。干扰IQGAP1表达后能提高食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性，提示IQGAP1可能是提高食管鳞癌化疗敏感性的重要治疗靶点。

• 单位
  山西医科大学; 山西省人民医院