基于NF-κB信号通路探究木犀草素对宫颈癌细胞增殖和凋亡的调控作用

作者：赵新然; 王玉娜; 曾倩

来源：中医药导报, 2023, 29(06): 22-27.

DOI：10.13862/j.cn43-1446/r.2023.06.004

• 宫颈癌
• 木犀草素
• 细胞增殖
• 细胞克隆
• 细胞凋亡
• 核转录因子-κB
• 信号通络

目的：探讨木犀草素对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其对核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法：将HeLa细胞分为对照组、5μmol/L木犀草素组、10μmol/L木犀草素组、20μmol/L木犀草素组和抑制剂组。5、10、20μmol/L木犀草素组HeLa细胞分别经不同浓度（5、10和20μmol/L）木犀草素处理24 h，对照组HeLa细胞不做处理。筛选出10μmol/L为木犀草素最适浓度，然后将细胞分为对照组、10μmol/L木犀草素组和抑制剂组[10μmol/L木犀草素+2.5μmol/L BAY 11-7082(NF-κB信号通路抑制剂)]。采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）测定细胞增殖情况，平板克隆测定细胞克隆情况，Hoechst 33258测定细胞凋亡情况，实时荧光定量PCR(RT-qPCR测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA和细胞周期素D1(Cyclin D1)mRNA表达，蛋白免疫印迹（Western blotting）法测定Caspase-3、Cyclin D1、NF-κB和p-NF-κB蛋白表达。结果：10、20μmol/L木犀草素组细胞增殖率、克隆形成率、Cyclin D1 mRNA和Cyclin D1蛋白相对表达量低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;10、20μmol/L木犀草素组细胞凋亡数、Caspase-3 mRNA和Caspase-3蛋白相对表达量均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。因此本实验选择低浓度（10μmol/L）木犀草素加入NF-κB通路抑制剂作为抑制剂组进行后续验证实验。抑制剂组细胞增殖率和克隆形成率低于10μmol/L木犀草素组，差异有统计学意义（P<0.05）。10μmol/L木犀草素组Cyclin D1 mRNA、Cyclin D1蛋白、p-NF-κB蛋白相对表达量低于对照组，Caspase-3 mRNA和Caspase-3蛋白相对表达量高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；抑制剂组Cyclin D1mRNA、Cyclin D1蛋白、p-NF-κB蛋白相对表达量低于10μmol/L木犀草素组，Caspase-3 mRNA和Caspase-3蛋白相对表达量高于10μmol/L木犀草素组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：木犀草素可能通过抑制NF-κB信号通路诱导HeLa细胞的凋亡并减弱其增殖能力。

• 单位
  河北省沧州中西医结合医院