斯氏副柔线虫免疫相关基因CSY原核表达载体的构建及生物信息学分析

作者:赵学亮; 孙柯; 王梦雅; 白丽艳; 冯陈晨; 王文龙*
来源:中国兽医学报, 2018, 38(10): 1901-1907.
DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.10.12

摘要

采用RT-PCR克隆斯氏副柔线虫CSY基因的CDS区,限制性内切酶对目的片段与pET30a(+)原核表达载体进行双酶切,构建重组表达载体,利用生物信息学软件对该基因理化性质、结构特点进行分析。结果显示:CSY基因全长774bp,编码255个氨基酸,蛋白质理论大小值为29 240,理论等电点为7.53,蛋白质不稳定指数为40.09;跨膜结构和信号肽分析表明CSY蛋白无跨膜区,无信号肽区域。结果表明:成功构建了pET-30a(+)-CSY重组表达载体;生物信息学分析表明CSY蛋白是一种抗原性较高的亲水性蛋白,可能有7个B细胞抗原表位和8个T细胞抗原表位,有望用于斯氏副柔线虫的免疫诊断抗原和疫苗候选抗原。

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