肉灵芝提取物调控长链非编码RNA BRCA1相邻基因2/双特异性磷酸酶4/细胞外信号调节激酶通路对肝癌细胞Hep3B增殖及凋亡的影响

作者：李霞; 李慧; 许聪聪; 李军峰; 张冬冬

来源：安徽医药, 2022, 26(11): 2208-2212.

• 肉灵芝提取物
• 长链非编码RNA
• BRCA1相邻基因2
• DUSP4/ERK
• 肝癌

目的 探讨肉灵芝提取物是否可通过长链非编码RNA BRCA1相邻基因2(LncRNA NBR2)/双特异性磷酸酶4/细胞外信号调节激酶(DUSP4/ERK)通路而影响肝癌HepB细胞增殖及凋亡。方法 体外培养肝癌HepB细胞，分为1 mg/L肉灵芝提取物组、2 mg/L肉灵芝提取物组、4 mg/L肉灵芝提取物组、si-NC组、si-LncRNA NBR2组、pcDNA-NC组、pcDNA-LncRNA NBR2组、肉灵芝提取物+si-NC组、肉灵芝提取物+si-LncRNA NBR2组；采用MTT检测肝癌HepB细胞增殖；流式细胞术检测肝癌HepB细胞凋亡；RT-qPCR检测LncRNA NBR2的表达量；蛋白质印迹法(Western blotting)检测增殖细胞核抗原(PCNA)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)、DUSP4、p-ERK蛋白表达量。结果 肉灵芝提取物可明显降低肝癌HepB细胞增殖率与PCNA、DUSP4、p-ERK蛋白水平(P<0.05)，提高肝癌HepB细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白水平及LncRNA NBR2的表达水平(P<0.05)；转染si-LncRNA NBR2后可明显提高肝癌HepB细胞增殖率及PCNA、DUSP4、p-ERK蛋白水平(P<0.05)，降低凋亡率及Cleaved-caspase-3蛋白水平(P<0.05)，而转染pcDNA-NBR2可明显减弱转染si-LncRNA NBR2对肝癌HepB细胞增殖及凋亡的作用；与肉灵芝提取物+si-NC组比较，肉灵芝提取物+si-LncRNA NBR2组肝癌HepB细胞增殖率及PCNA、DUSP4、p-ERK蛋白水平升高(P<0.05)，凋亡率及Cleaved-caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。结论 肉灵芝提取物可通过上调LncRNA NBR2的表达而抑制DUSP4/ERK信号通路的活化从而抑制肝癌HepB细胞增殖及诱导细胞凋亡。

• 单位
  枣庄市薛城区人民医院; 枣庄矿业集团枣庄医院