人脐血间充质干细胞对脐血CD+34细胞体外扩增作用的研究

作者:周敦华; 黄绍良; 张绪超; 魏菁; 吴燕峰; 黄科; 黎阳; 方建培
来源:中华儿科杂志, 2005, 43(7): 494-498.
DOI:10.3760/j.issn:0578-1310.2005.07.004

摘要

目的探讨含人脐血来源的间充质干细胞(MSCs)体系在体外对脐血造血干细胞(HSCs)扩增作用.方法 (1)用含人脐血MSCs及不同造血生长因子(HGFs)组合的无血清扩增体系对人脐血CD+34细胞进行体外扩增.(2)于扩增前及扩增后第6、12天分别用双色流式细胞仪动态检测HSCs表面抗原标记:CD+34、CD+34CD-38、CD+34CD+3、CD+34CD+19、CD+34 CD+33和CD+34CD+41a 细胞的含量.(3)按本实验室方法行体外半固体培养,观察扩增前后脐血细胞粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、爆式红系集落形成单位(BFU-E)、混合集落形成单位(CFU-Mix)及高增殖集落形成单位(CFU-HPP)集落形成情况.结果 (1) 含人脐血MSCs体系对脐血CD+34CD 38细胞的扩增倍数在第6天和第12天分别为159和 437倍.该亚群百分比在单纯因子组扩增第12天时为1.98%,而在含脐血MSCs组为9.98%,明显高于扩增前.(2)集落培养表明,含脐血MSCs组扩增第12天与扩增第6天相比,其CFU-Mix 和CFU-HPP的扩增倍数增加,而单纯因子组这两种集落的扩增倍数下降.(3)随扩增天数的增加,两组扩增体系中CD+34CD+3和CD+34CD+41a 细胞均明显增加,而CD+34CD+19和 CD+34CD+3细胞均明显减少.两组相比,含脐血MSCs组差异更显著.结论 (1) 含脐血MSCs体系不仅能扩增更原始的造血干/祖细胞(HSPC),且具有在短期内(12 d)保持HSCs不耗竭.(2)含脐血MSCs体系对脐血CD+34细胞向定向祖细胞的扩增,主要为髓系及巨核系祖细胞,而对其向淋巴系祖细胞的扩增具有抑制作用.

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