补脾益肠丸干预Notch信号重塑Th17/Treg细胞平衡治疗溃疡性结肠炎的作用机制

作者：钟友宝; 黄佳琦; 黄莉; 张哲言; 施旻; 左铮云; 王海燕; 赵海梅; 刘端勇^*

来源：中华中医药杂志, 2023, 38(07): 3072-3079.

• 补脾益肠丸
• 结肠炎
• Th17细胞
• Treg细胞
• Notch信号
• 作用机制

目的：基于Th17/Treg细胞平衡探究补脾益肠丸(BPYCP)干预Notch信号通路治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法：葡聚糖硫酸钠诱导小鼠UC,BPYCP和5-ASA同步给药；实验期内观察小鼠临床症状及称重，实验结束时采集结肠样品、测量其长度并称重，病理组织技术评价结肠损伤；流式细胞术检测肠系膜淋巴结中Th17/Treg细胞比例，qPCR和ELISA检测相关核转录因子及分泌的细胞因子IL-17A/IL-10的表达水平；Western Blot和qPCR检测结肠组织中Notch信号分子DLL1、DLL3、DLL4、Jagged1、Jagged2、Notch1、Notch2、Notch3、Hes1、Hes2和Hes5的表达水平；相关性分析Notch1基因与Th17/Treg细胞的相关性，进一步流式检测Th17/Treg细胞的Notch1表达水平。结果：BPYCP可有效缓解DSS诱导的小鼠实验结肠炎，并呈典型的剂量依赖相关性，体质量损失减小、疾病活动指数下降、生存率上升，结肠显著延长，而结肠重量、结肠重量/结肠长度、结肠重量指数显著下降，结肠组织溃疡及炎性细胞浸润明显改善；与DSS组比较，中、高剂量BPYCP给药处理的结肠炎小鼠CD4+CCR6+、CD4+IL-17A+Th17细胞及其转录调控因子(AHR,BATF,RORɑ和RORγt)、细胞因子IL-17A表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01)；与此同时，中、高剂量BPYCP给药处理的结肠炎小鼠CD4+CD25+、CD4+CD25+Foxp3+、CD4+IL-10+Treg细胞及其转录调控因子(Eomes,Foxp3)、细胞因子IL-10表达水平显著上升(P<0.05,P<0.01)；此外，BPYCP抑制结肠炎小鼠Notch信号活化，结肠组织中DLL1、DLL4、Jagged1、Jagged2、Notch1、Notch2和Hes1基因蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)；相关性分析进一步发现Notch1基因水平与Th17细胞数量呈正相关，而与Treg呈负相关，且BPYCP有效逆转了Th17和Treg细胞的Notch1的表达。结论：BPYCP重塑Th17/Treg细胞平衡有效治疗DSS诱导的小鼠UC，其潜在的作用机制与抑制Notch信号密切相关。

• 单位
  江西中医药大学