摘要

目的 通过体外实验探究黑果小檗根(Berberis heteropoda Schrenk roots)不同极性部位的肠道解痉作用和抗炎活性;通过成分对比分析,初步推测潜在活性组分。方法 (1)用60%乙醇和水分别提取黑果小檗根的主要成分,再对乙醇提取物依次进行系统溶剂萃取(石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和饱和正丁醇),得到不同极性萃取物。(2)采用高效凝相色谱法(HPLC法)对不同极性提取物中代表性组分进行定量分析并比较其含量差异。(3)通过小鼠离体结肠平滑肌实验,研究不同提取物对正常和痉挛状态下肠道肌肉张力的影响,筛选具有抑制肠痉挛作用的活性部位。(4)采用脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞建立体外炎症细胞模型,通过不同提取物干预后测定细胞上清液中一氧化氮(NO)和白介素-6(IL-6)含量,筛选抗炎活性部位。(5)采用半制备液相色谱法对潜在活性部位进行成分分离,并用核磁共振法和质谱法进行成分定性。结果 (1)HPLC成分对比分析表明,饱和正丁醇萃取物中木兰花碱、非洲防己碱、药根碱的含量高于其他萃取物,二氯甲烷萃取物中小檗胺、阿魏酸、巴马汀和小檗碱的含量高于其他萃取物。此外,发现乙酸乙酯萃取物中含有明显区别于其他萃取物的的未知峰(峰面积占比60%)。(2)小鼠结肠张力的体外实验结果表明,二氯甲烷萃取物对正常小鼠结肠张力有明显的抑制作用。此外,二氯甲烷萃取物可缓解乙酰胆碱和氯化钡引起的肠痉挛。(3)炎症细胞模型干预实验的结果表明,乙酸乙酯萃取物的抗炎作用明显优于其他萃取物。(4)从乙酸乙酯萃取物中分离得到了先前发现的未知峰化合物,结果鉴定为阿魏酸-4-O-葡萄糖苷。结论 研究发现黑果小檗根二氯甲烷部位同比其他部位的肠道解痉作用最强,同时乙酸乙酯部位是发挥抗炎作用的主要活性部位,以此丰富了黑果小檗根已知的药理作用。此外,从黑果小檗根中首次分离得到了化合物:阿魏酸-4-O-葡萄糖苷,为黑果小檗根的物质基础研究提供了参考。

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