干扰素-α诱导HepG_2 2.2.15细胞APOBEC3G的表达及其机制

作者：王鲁文; 陈辉; 褚小刚; 严少南; 龚作炯

来源：中国感染控制杂志, 2009, 8(03): 155-159.

• 载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样3G
• 干扰素-α
• HepG22.2.15细胞
• STAT-1
• 肝炎,乙型

目的探讨干扰素(IFN)-α刺激HepG22.2.15细胞后,对载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样3G(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide-like 3G,APOBEC3G)表达的影响,以及初步探讨Ja-nus激酶-信号传导和转录激活子(JAK-STAT)信号通道是否参与APOBEC3G基因转录调控。方法对HepG22.2.15细胞给予不同剂量(0、1、101、102、103、104U/mL)IFN-α刺激8h时,以及103U/mLIFN-α刺激2、4、6、8、10、12h时,收集细胞或培养上清液。应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测HepG22.2.15细胞APOBEC3G、STAT-1 mRNA及蛋白的表达水平。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中乙型肝炎表面抗原与e抗原(HBsAg与HBeAg)水平,应用实时荧光定量PCR及RT-PCR分别检测上清液中HBV DNA水平以及细胞中HBV mRNA水平。结果无IFN-α(0U/mL)刺激时,HepG22.2.15细胞APOBEC3G表达水平很低。随着IFN-α浓度的升高,APOBEC3G mRNA及蛋白水平逐步升高,IFN-α浓度为104U/mL时,APOBEC3G表达量最高,并且STAT-1分子mRNA及蛋白的表达量亦逐步升高,与APOBEC3G表达量呈现平行相关。随着IFN-α刺激时间的延长,APOBEC3G表达量明显升高,8h时达到最高,其后逐渐下降。104U/mLIFN-α刺激8h时,HepG22.2.15细胞培养上清液中HBsAg、HBeAg、HBV DNA及细胞中HBV mR-NA水平均明显低于无IFN-α刺激的HepG22.2.15细胞。结论IFN-α能诱导HepG22.2.15细胞表达APO-BEC3G,在一定范围内,APOBEC3G的表达与IFN-α的剂量、作用时间呈正相关;IFN-α诱导APOBEC3G的表达可能是其发挥抗病毒作用的机制之一;IFN-α是否经JAK-STAT信号通道刺激APOBEC3G的表达,二者之间的关系及其机制尚待进一步研究。

• 单位
  湖北省疾病预防控制中心; 武汉大学人民医院; 武汉大学; 病毒学国家重点实验室