NOD1对甲状腺癌细胞BPCPA恶性生物学功能的影响及机制

作者：白宁; 刘春燕; 李颖; 张晓乐; 侯德强^*

来源：肿瘤预防与治疗, 2022, 35(07): 590-597.

• NOD1
• 甲状腺癌
• 增殖
• 迁移
• 侵袭
• MAPK通路

目的:探讨核苷酸结合寡聚结构域1(nucleotide-binding oligomerization domain 1,NOD1)对甲状腺癌细胞BPCPA生物学行为的影响及其调控机制。方法:通过siRNA技术干扰甲状腺癌细胞株BPCPA中NOD1的表达水平，转染空载体质粒NC-siRNA的细胞命名为siNC组，转染NOD1干扰质粒NOD1-siRNA的细胞命名为siNOD1组。采用qRT-PCR和Western blot验证干扰效果；采用EdU增殖实验检测NOD1表达下调后细胞增殖的变化；流式细胞术检测NOD1表达下调后细胞周期和凋亡的变化；细胞划痕实验检测NOD1表达下调后细胞运动能力的变化；Transwell实验检测NOD1表达下调后细胞侵袭能力的变化；Western blot检测干扰NOD1对MAPK信号通路的影响。结果:转染NOD1-siRNA后，siNOD1组细胞中NOD1的mRNA和蛋白表达水平较siNC组明显下降(0.194±0.059 vs 1.00±0.000,t=19.220,P<0.001;0.073±0.020 vs 0.352±0.040,t=8.852,P<0.001);siNOD1组细胞的EdU阳性率高于siNC组(76.41%±3.75%vs 28.75%±3.79%,t=4.751,P<0.001);相较于siNC组细胞，siNOD1组G1期细胞比例下降(66.23%±4.28%vs 55.38%±3.11%,t=2.902,P=0.044),S期和G2/M期细胞比例增加(22.41%±2.87%vs 36.00%±3.49%,t=4.249,P=0.013;6.84%±0.50%vs 10.92%±1.08%,t=4.859,P=0.010);siNOD1组和siNC组细胞的凋亡率差异无统计学意义(8.47%±0.61%vs 8.74%±1.03%,t=0.322,P=0.763);siNOD1组细胞划痕愈合距离显著多于siNC组[(609.33±41.11)μm vs(316.63±24.05)μm,t=8.691,P=0.001];siNOD1组侵袭细胞数量为(545.3±24.5)个，显著多于siNC组(392.3±17.6)个(t=5.060,P=0.007);siNOD1组细胞的P38和ERK磷酸化水平较siNC组高(1.196±0.045 vs 0.357±0.030,t=21.961,P<0.001;0.764±0.039 vs 0.219±0.038,t=14.265,P<0.001)。结论:NOD1通过MAPK信号通路抑制甲状腺癌细胞BPCPA的增殖和转移，可能是甲状腺癌潜在的治疗靶点。