水相合成荧光纳米晶与碱性蛋白酶的偶联及纯化

作者：祝金明; 孙卓; 付瑶; 郭轶; 徐力

来源：高等学校化学学报, 2015, 36(03): 511-515.

• 荧光纳米晶
• 碱性蛋白酶
• 偶联标记
• 纯化

利用水相中合成的巯基丙酸包覆的Cd Te荧光纳米晶与碱性蛋白酶(Alcalase)进行偶联标记.荧光光谱分析表明,Cd Te纳米晶体具有较窄的粒度分布和较高的光稳定性,室温下30 d时荧光强度降低8.36%.透射电子显微镜结果显示,Cd Te纳米晶的直径约为3 nm;X射线衍射结果表明,Ce Te纳米晶具有闪锌矿结构.利用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐(NHSS)偶联方法将Cd Te纳米晶与Alcalase进行偶联,通过超滤离心、凝胶柱层析及凝胶电泳技术对偶联后的Cd Te-Alcalase进行分离和纯化.荧光光谱显示偶联产物具有很好的光稳定性和较高的酶活力(61.06 U/μg).在荧光显微镜下可观察到标记蛋白的荧光,为研究酶反应的示踪及酶的构效关系等提供了实验基础.

• 单位
  生命科学学院; 吉林大学; 吉林大学中日联谊医院