体外培养人牙囊细胞表达的OPG和RANKL对破骨细胞表型分化的影响

作者：孙海燕; 金作霖; 张永宽; 林珠

来源：中国美容医学, 2009, (08): 1121-1125.

DOI：10.15909/j.cnki.cn61-1347/r.2009.08.049

• 牙囊
• 牙齿萌出
• 集落刺激因子-1
• 甲状旁腺相关蛋白
• 骨保护素
• 核心因子kappB受体激活剂
• 破骨细胞形成

目的:建立人牙囊细胞(Human dental follicle cells,HDFCs)与人外周血单核细胞(Peripheral blood monocytes,PBMCs)共培养体系,研究体外培养人牙囊细胞表达的骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)和核心因子kappB受体激活剂(Receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)对破骨细胞表型分化的影响。方法:取健康成人外周血分离出单核细胞,同时分离12～14岁青少年第三磨牙牙囊进行原代培养,建立两种细胞共同培养系统。实验分七组:A、单核细胞;B、单核细胞+牙囊细胞(接触);C、单核细胞+牙囊细胞(接触)+集落刺激因子-1(Colony stimulating factor-1,CSF-1)+甲状旁腺相关蛋白(Parat hyroidhormone-related protein,PTHrP);D、单核细胞+牙囊细胞(不接触);E、单核细胞+RANKL+CSF-1;F、单核细胞+RANKL+CSF-1+牙囊细胞(不接触);G、单核细胞+RANKL+CSF-1+牙囊细胞(不接触)+anti-OPG。把每组细胞接种到预置玻片和牙本质片的24孔板中培养,观察细胞变化。培养第10天,取出玻片,进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,计数每组TRAP染色阳性细胞;第14天取出牙本质片,扫描电镜下观察骨陷窝形成情况。结果:B、F组可见少量破骨样细胞,A、D组无破骨样细胞,E组破骨样细胞分化最显著,C、G组破骨样细胞较E组略少,但无显著性差别(P>0.05),与其他各组差别显著(P<0.05)。结论:实验结果证实体外培养人牙囊细胞表达的RANKL和OPG分别对破骨细胞表型分化具有正向和负向调节作用。

• 单位
  第四军医大学