摘要
目的 探讨酶法提取大鲵(Andrias davidianus)皮胶原蛋白肽的抗原性,为进一步研究大鲵皮胶原蛋白肽的生物相容性提供依据。方法 采用酶法提取获得大鲵皮胶原蛋白肽,并对得到的胶原蛋白肽进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析,确定其分子量分布范围。将得到的胶原蛋白肽与弗氏佐剂混合乳化后经免疫程序免疫ICR (Institute of Cancer Research)小鼠,采用抗体酶联免疫试剂盒检测小鼠血清中IgG、IgA、IgM及IgE含量。结果 酶解后的胶原蛋白肽分子量均小于10 k Da,多数肽分子量集中在2000~5000 m/z,检测血清中Ig A、Ig G、Ig M和Ig E 4种免疫球蛋白的质量浓度范围分别是71.63~85.90μg/m L、705.19~857.04 ng/m L、47.04~57.46 ng/m L与224.54~261.0μg/m L。结论 采用碱性蛋白酶酶解获得的大鲵皮胶原蛋白肽对ICR小鼠呈现出较弱的抗原性。
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