摘要
目的通过Oct4介导小鼠肝细胞去分化为Sox17阳性细胞,探索肝胰重编程新途径。方法构建慢病毒载体pWPT-Oct4,包装和浓缩病毒;改良两步胶原酶灌流法分离小鼠原代肝细胞;Oct4-慢病毒浓缩液感染小鼠原代肝细胞,RT-PCR检测肝细胞及内胚层转录因子的表达。结果通过酶切、测序鉴定,证实成功构建包含Oct4慢病毒表达载体。感染肝细胞后,外源性Oct4出现表达,成熟的肝细胞转录因子(Alb、Ttr、Afp)表达下降,并表达内胚层早期标记物Sox17,而没有Oct4、Nanog及Sox2等多能性基因的内源性表达。结论 Oct4介导肝细胞去分化,并出现Sox17阳性细胞,为进一步将Sox17阳性细胞分化为胰岛素产生细胞奠定基础。
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单位解放军总医院