摘要
目的观察龙胆泻肝汤氯仿提取物(chloroform extracts of Longdan xiegan decoction,CELX)对白念珠菌菌丝形成的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用微量稀释法测定龙胆泻肝汤不同溶剂提取物对15株VVC临床株的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC);采用固体培养基和半固体培养基观测菌落形态及菌丝侵袭能力;XTT还原法评价白念珠菌菌丝活性;平板法计数6h内药物对白念珠菌CFU的影响;荧光显微镜下观察菌丝代谢活力;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其菌丝相关基因:ALS3、SSA1、SUN41、HWP1、UME6和ECE1的表达量。结果 CELX对15株VVC临床株MIC介于3264mg/L之间,效果优于总提物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物的MIC;256mg/L的CELX能显著抑制菌丝的形成;256mg/L的CELX在固体培养基中可抑制菌落褶皱,在半固体培养基中可抑制菌丝侵袭;qRT-PCR结果显示256 mg/L CELX可使菌丝相关基因ALS3、SSA1、SUN41、HWP1、UME6和ECE1分别下调81.6%、60.2%、69.8%、73.7%、49.5%、52.8%。结论龙胆泻肝汤氯仿提取物(CELX)可通过影响菌丝相关基因的表达来抑制菌丝的形成,从而降低白念珠菌对机体的侵袭力。
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