量子点微生物传感器核酸检测中离子强度的优化

作者：罗阳; 高维寅; 陈鸣; 王珏; 张波; 黄君富; 府伟灵

来源：中华医院感染学杂志, 2010, 20(11): 1527-1530.

• 离子强度
• 微生物传感器
• 核酸杂交
• 量子点

目的探讨并建立量子点核酸传感器检测微生物样本时缓冲液中最佳阳离子价态及最优离子强度。方法采用巯基法固定金黄色葡萄球菌16S rDNA探针于石英晶体微阵列上,并用石英晶体微天平(QCM)检测样品频率漂移量以确定最佳离子强度,并用荧光显微镜观察不同反应体系中杂交完成后的荧光强度和荧光效率,以此判断单价和二价阳离子对荧光效率和杂交效率的影响,并运用SPSS软件对数据进行统计分析。结果该量子点传感器检测平台具有良好的性噪比;对于普通的短链核酸杂交反应,随着离子强度增加,杂交效率呈现先增后减的趋势,当离子强度为20mmol/L时,杂交效率达到峰值,荧光强度约为0.95AU;对于MgCl2缓冲液,当离子强度为15mmol/L时,杂交效率达到最大,约为0.82AU;对于CuCl2缓冲液,离子强度为15mmol/L时,杂交效率达到峰值,约为0.72AU。结论单价阳离子NaCl缓冲液是基于荧光检测的微生物传感器的首选,其最佳离子强度为20mmol/L,缓冲液体系中应尽量避免添加二价阳离子。

• 单位
  第三军医大学第三附属医院; 第三军医大学第一附属医院