p53凋亡刺激蛋白2在HepG2.215细胞中通过抑制自噬来发挥抗乙型肝炎病毒的作用

作者：刘东杰; 纪乐; 刘凯; 陈德喜^*; 吴刚^*

来源：转化医学杂志, 2018, 7(05): 285-313.

• p53凋亡刺激蛋白2
• 乙型肝炎病毒
• 自噬

目的研究p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)对乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBs Ag)和乙型肝炎E抗原(hepatitis Be antigen,HBe Ag)表达的影响。方法 HepG2. 215细胞用3-甲基腺嘌呤处理来抑制自噬,或用人ASPP2重组腺病毒感染来诱导ASPP2过表达,或转染GFP-LC3质粒后观察绿色LC3-Ⅱ颗粒(自噬标志物)的变化。酶联免疫吸附测定检测培养上清和胞内HBs Ag和HBe Ag的水平、免疫荧光检测LC3-Ⅱ颗粒的水平、免疫印记检测自噬相关蛋白的水平、免疫沉淀检测ASPP2与自噬相关蛋白的结合。结果 ASPP2过表达明显下调了绿色LC3-Ⅱ颗粒的水平和LC3-Ⅱ/Ⅰ比例、以及明显上调p62的水平,说明ASPP2过表达可抑制HepG2. 215细胞的自噬。但是ASPP2并非通过抑制Atg5、Atg14和Beclin-1等自噬相关基因的表达来抑制自噬,而是通过与Atg14结合来抑制Atg14与Beclin-1的结合,阻断自噬体膜的形成,从而抑制自噬。抑制自噬和ASPP2过表达均导致培养上清和细胞内的HBs Ag和HBe Ag水平明显下调,表明在Hep2. 215中,ASPP2通过抑制自噬来抑制HBs Ag和HBe Ag的产生。结论ASPP2通过抑制自噬的作用具有抗乙型肝炎病毒感染的潜力。

• 单位
  首都医科大学附属北京佑安医院; 内蒙古科技大学包头医学院; 北京市肝病研究所