含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链基因表达载体的构建

作者：罗威; 黄文广; 殷涛

来源：郑州大学学报(医学版), 2005, 40(3): 473-476.

DOI：10.3969/j.issn.1671-6825.2005.03.037

• DF3/MUC1
• 转录调控序列
• 白喉毒素A链
• 克隆
• 重组质粒
• 乳癌

目的:构建含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链(DTA)基因的重组表达载体.方法:利用PCR技术从人乳癌细胞MCF-7中扩增出DF3/MUC1启动子的转录调控序列并克隆入pMD18T载体中,再从pMD18T-DF3重组质粒中切下DF3/MUC1启动子的转录调控序列并亚克隆入pGL3-Basic载体,构建重组质粒pGL3-DF3.从质粒pIBI30-DTA中切下DTA片断,以DTA基因替换重组质粒pGL3-DF3中的虫荧光素酶基因,构建重组质粒pGL3-DF3-DTA.结果:构建了含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和DTA的表达载体,酶切和测序结果与预期完全相符.结论:重组质粒pGL3-DF3-DTA构建成功.

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院