摘要
目的研究常用组织材料脱细胞试剂十二烷基硫酸钠(SDS)、聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)和硫代甜菜碱10(SB-10)的残留量与细胞毒性的相关性, 并找出控制试剂残留的安全阈值。方法参照GB/T 16886.5中的细胞毒性检测方法, 分别检测不同质量浓度的SDS、Triton X-100、SB-10对L-929细胞和MC3T3-E1细胞的细胞毒性。细化上述3种脱细胞试剂的质量浓度区间, 确定单种试剂残留无细胞毒性的阈值。将3种试剂两两混合或3种共混, 通过细胞毒性实验确定试剂混合后无细胞毒性的阈值。结果 SDS、Triton X-100和SB-10对L-929细胞产生细胞毒性的临界浓度分别为4×10-3、2×10-2和6×10-1 mg/ml, 对MC3T3-E1细胞产生细胞毒性的临界浓度分别为6×10-3、4×10-2和2 mg/ml。3种试剂细胞毒性大小趋势为SDS>Triton X-100>SB-10。将临界浓度的3种试剂两两混合或3种共混, 对L-929细胞和MC3T3-E1细胞均无细胞毒性。结论采用上述3种脱细胞试剂制备脱细胞支架时应采用多种试剂清洗工序, 高效清洗组织使试剂残留量低于临界值, 以确保脱细胞支架的生物安全性。
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单位首都医科大学; 首都医科大学附属北京同仁医院