人参皂苷Rb1促进小鼠坐骨神经损伤修复的作用及机制

作者：姚远; 杜静怡; 周文娟^*

来源：解剖学报, 2022, 53(01): 19-27.

DOI：10.16098/j.issn.0529-1356.2022.01.003

• 坐骨神经损伤
• 人参皂苷Rb1
• 轴突再生
• 髓鞘再生
• 施万细胞
• 实时定量聚合酶链反应
• 免疫印迹法
• 小鼠

目的构建小鼠坐骨神经损伤(SNI)模型,探讨人参皂苷Rb1对小鼠坐骨神经损伤修复的促进作用及机制。方法选取成年雄性昆明小鼠78只,随机分为假手术组(26只)、模型组(26只)、治疗组(26只)。模型制作采用钳夹损伤法,假手术组仅游离坐骨神经。模型制作后30 min,治疗组腹腔注射10 mg/kg人参皂苷Rb1,模型组与假手术组给予同等体积的生理盐水。采用坐骨神经功能指数(SFI)对小鼠坐骨神经功能进行追踪评价;利用HE染色及生长相关蛋白43(GAP43)免疫荧光染色检测损伤14 d后坐骨神经再生修复情况;利用透射电子显微镜观察损伤节段髓鞘的结构改变。损伤后14 d,检测脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)mRNA水平的表达变化。模型制作后3 d、7 d,利用Ki67、S100β免疫荧光染色检测施万细胞的增殖、迁移能力;利用Real-time PCR检测炎症相关因子以及施万细胞激活相关转录因子mRNA表达水平;通过Western blotting对Sox10在蛋白水平的变化进行验证。结果治疗组SFI评分高于模型组小鼠,神经近端、远端HE染色较均一。透射电子显微镜提示,治疗组髓鞘结构、厚度较模型组明显改善,髓鞘内神经纤维排列较为整齐。免疫荧光染色结果显示,治疗组坐骨神经GAP43+轴突伸长明显优于模型组,BDNF、NGF等营养因子表达升高。进一步检测发现,给予Rb1后损伤节段附近Ki67+细胞增殖、S100β+施万细胞迁移明显增多。Real-time PCR结果显示,治疗组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1βmRNA表达水平明显下降,施万细胞激活相关转录因子表达水平上升。结论 10 mg/kg Rb1能降低再生组织环境中炎症因子表达水平,增加BDNF、NGF等营养因子的表达水平,促进施万细胞激活,从而促进小鼠坐骨神经损伤后的神经再生。

• 单位
  基础医学院; 山东大学