萌发期大豆总蛋白提取及双向电泳体系的优化

作者：王新芳; 郭娜; 郭祥龙; 牛景萍; 张海鹏; 卜远鹏; 彭洋; 邢邯; 赵晋铭

来源：中国油料作物学报, 2015, 37(02): 220-226.

• 大豆
• 萌发
• 蛋白组学
• 双向电泳

蛋白质样品的制备和双向电泳条件是蛋白组学研究中很关键同时也是很棘手的问题。本文比较了TCA/丙酮法、酚抽提、苯酚/SDS法3种不同的蛋白提取方法,并对双向电泳的一些条件进行了优化,建立了适合萌发期大豆总蛋白的双向电泳体系,即采用17cm、p H4-7的IPG胶条,凝胶浓度为12%,蛋白质上样量为0.2mg。IEF程序为:250V 1h,500V 1h,3 000V 3h,8 000V 1h,10 000V 1h,10 000V 60 000Vh。本研究为萌发期大豆的蛋白组学研究提供了实验方法。

• 单位
  农业部; 南京农业大学; 作物遗传与种质创新国家重点实验室