塞内卡病毒Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

作者：陈鑫; 莫红芳; 刘文强; 李祥敏; 陈焕春; 金梅林; 钱平^*

来源：中国兽医学报, 2019, 39(12): 2293-2297.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.12.04

• 塞内卡病毒(SVV)
• 猪特发性水疱病
• Taqman荧光定量PCR

根据对GenBank中2015-2017年登录的18株国内塞内卡病毒(SVV)基因组序列比对分析结果,设计合成1对针对SVV 5’UTR区域的特异性引物和Taqman探针,通过优化荧光定量PCR反应条件,建立一种定量检测SVV的Taqman实时荧光定量PCR检测方法。该方法定量检测范围在10～109 copies/μL,检测下限为10 copies/μL,比常规PCR检测灵敏度高约1 000倍,同时检测口蹄疫病毒(FMDV)、猪水疱病病毒(SVDV)、猪水疱疹病毒(VSV)、圆环病毒(PCV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)均为阴性,特异性良好;对50份疑似病料同时进行荧光定量PCR检测和常规PCR检测,结果显示荧光定量PCR阳性检测率(38%)高于常规PCR阳性检测率(25%),证实本试验建立的SVV Taqman实时荧光定量PCR检测方法可实现对SVV的临床诊断和定量分析。

• 单位
  华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室