摘要
目的研究蟛蜞菊内酯(WEL)对人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法将HCAECs分成6组:空白组、溶剂对照组、模型组和低、中、高3个剂量实验组。在对数生长期的HCAECs细胞中,加入200μmol·L-1 H2O2孵育24 h制备细胞损伤模型;空白组细胞不做任何处理。造模前,实验组加入低、中、高3个剂量(10,20,40μmol·L-1) WEL预处理30min;溶剂对照组加入0. 1%二甲基亚砜。24 h后,以MTT法检测细胞存活率,按试剂盒说明测定乳酸脱氢酶(LDH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,以免疫印迹法测定帕金森病蛋白7(DJ-1/PARK7)的表达水平。结果空白组、溶剂对照组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的细胞活力分别为(100. 0±15. 2)%,(99. 5±14. 6)%,(53. 1±13. 8)%,(65. 3±12. 7)%,(76. 8±13. 9)%和(85. 6±14. 4)%;这6组LDH释放量分别为(17. 12±1. 18),(17. 38±1. 22),(51. 42±4. 57),(44. 11±4. 02),(36. 25±3. 43)和(30. 11±2. 89) U·L-1;这6组的GSH-Px释放量分别为(141. 27±12. 81),(140. 56±12. 31),(70. 27±8. 04),(89. 32±9. 47),(110. 51±11. 76)和(121. 52±12. 73)μmol·L-1,模型组与空白组相比,细胞活力和GSH-Px释放量均明显下降,而LDH释放量上升,差异均有统计学意义(均P <0. 01);低、中、高3个剂量实验组与模型组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 01;低剂量实验组的LDH:P <0. 05)。空白组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的的DJ-1的蛋白表达水平分别为1. 97±0. 31,0. 61±0. 08,0. 80±0. 11,0. 94±0. 21和1. 22±0. 26,模型组与空白组相比,差异有统计学意义(P <0. 05);低、中、高3个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论 WEL可以减轻过氧化氢引起的血管内皮细胞氧化应激损伤,机制可能与其上调DJ-1的表达有关。
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单位中山大学附属第一医院; 南方医科大学皮肤病医院; 南方医科大学第三附属医院