赤子爱胜蚓核酸酶样蛋白的纯化及其活性

作者：于保锋; 刘志贞; 张悦红; 解军; 程牛亮; 王建华; 牛勃

来源：中国生物制品学杂志, 2013, (05): 705-709.

DOI：10.13200/j.cjb.2013.05.126.yubf.008

• 赤子爱胜蚓
• 核酸酶样蛋白
• 纯化 Eisenia foetida
• Nuclease-like protein
• Purification

目的纯化赤子爱胜蚓核酸酶样蛋白,并鉴定其活性。方法将制备的赤子爱胜蚓核酸酶样蛋白粗提液透析后,经Bio-CAD CM柱层析系统非连续梯度洗脱,收集洗脱峰,对有活性的梯度洗脱峰样品进行单向聚丙烯酰胺凝胶电泳(1D-PAGE)及切胶纯化,将切胶回收纯化的蛋白样品进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE),回收蛋白,进行活性和浓度检测。结果透析后的蛋白粗提液经Bio-CAD CM柱层析分离,得到3个不同洗脱梯度的可降解DNA的活性峰,3个梯度蛋白的PAGE带型基本一致,经PAGE分离获得3个核酸酶样蛋白纯品EWD1、EWD2和EWD3,得率和纯化倍数分别为:27.9%,11.6;16.7%,11....

• 单位
  首都儿科研究所; 山西医科大学