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摘要
利用实时荧光定量PCR方法,检测绵羊前体脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞过程中Wnt/β-catenin信号通路关键基因的变化规律。无菌获得2月龄雄性绵羊腹股沟白色脂肪组织,体外分离培养前体脂肪细胞并传代,诱导为成熟脂肪细胞。采用第四代前体脂肪细胞为实验样本,分别在细胞长满培养皿、添加诱导I液48 h、诱导II液48 h、正常培养液48 h,即第2天、第4天、第6天、第8天提取细胞总RNA。本文检测了Wnt10b、Frizzled1、Frizzled2、GSK3β、LRP5、LRP6、β-catenin基因相对表达量。实时荧光定量PCR结果表明,Wnt10b、Frizzled1、GSK3β、LRP5、LRP6基因表达趋势一致,在第4天出现显著上升,然后显著下降;Frizzled2基因在第2天及第6天出现显著上升,而β-catenin基因在第8天出现显著上升。这些基因在绵羊脂肪细胞分化过程中出现显著变化,提示Wnt/β-catenin信号通路可能在绵羊脂代谢过程中发挥重要作用。这也为相关研究提供了一定参考。
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