外泌体介导miR-335-5p通过靶向LKB1对胶质瘤细胞上皮-间质转化的影响

作者：郑远航; 冯瑞军; 盛智梅; 李可欣; 董杰; 肖钦沛; 张宝刚^*

来源：临床与实验病理学杂志, 2023, 39(01): 36-41.

DOI：10.13315/j.cnki.cjcep.2023.01.007

• 胶质瘤
• 外泌体
• 上皮-间质转化
• miR-335-5p
• LKB1

目的 探讨外泌体中microRNA-335-5p(miR-335-5p)被胶质瘤细胞摄取并作用于肝激酶B1(liver kinase B1, LKB1)影响胶质瘤细胞侵袭的分子机制。方法 通过外泌体提取试剂盒提取外泌体；运用透射电镜、粒度仪、Western blot法鉴定分离获取的外泌体；RT-PCR检测不同肿瘤细胞来源外泌体中miR-335-5p的表达量；外泌体摄取实验检测胶质瘤细胞对外泌体的摄取情况；Transwell实验检测加入外泌体后胶质瘤细胞的侵袭能力；双荧光素酶报告实验验证miR-335-5p是否靶向结合LKB1;Transwell实验检测转染miR-335-5p mimic后胶质瘤细胞的侵袭能力；Western blot法检测转染miR-335-5p mimic后胶质瘤细胞中LKB1和上皮-间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和vimentin)的表达水平。结果 LN229细胞来源的外泌体中miR-335-5p表达水平明显高于H4细胞来源的外泌体；过表达miR-335-5p后LN229细胞侵袭能力增强；miR-335-5p靶向结合LKB1 mRNA的3′UTR区；miR-335-5p通过负向调控LKB1诱导胶质瘤细胞发生上皮-间质转化。结论 外泌体中的miR-335-5p被胶质瘤细胞摄取并通过抑制LKB1蛋白表达诱导细胞发生上皮-间质转化，从而促进胶质瘤细胞的侵袭。

• 单位
  潍坊医学院; 潍坊医学院附属医院