类鼻疽伯克霍尔德菌ΔrelA缺失株的构建及其生物学特性比较

作者：吴兴勇; 李雪苗; 刘成利; 田申; 王彦双; 厉安洋; 朱侨; 夏乾峰^*

来源：海南医学院学报, 2022, 28(15): 1135-1140.

DOI：10.13210/j.cnki.jhmu.20220616.001

• 类鼻疽伯克霍尔德菌
• relA
• 基因敲除
• 生物学特性

目的：敲除类鼻疽伯克霍尔德菌严谨反应信号分子（p）ppGpp合成相关基因relA，探讨其对细菌的生长、泳动和生物被膜形成的生物学功能的影响。方法：将甲氧苄啶（trimethoprim resistance,TPR）抗性片段通过BglⅡ酶切位点经酶切酶连的方法对含SacB蔗糖致死基因的pK18mobSacB自杀性质粒进行改造，从而获得具有甲氧苄啶抗性的质粒（TPR-pK18mobSacB）；通过同源重组基因的敲除方法对类鼻疽伯克霍尔德菌HNBP001的relA进行敲除，获得relA缺失菌株并测定比较其缺失前后生长、泳动、生物被膜的表型变化。结果：成功获得relA缺失菌株；ΔrelA的生长速度、泳动性及生物被膜形成均下降。结论：TPRpK18mobSacB改造质粒提高HNBP001菌株的敲除效率，可广泛应用于类鼻疽伯克霍尔德菌的基因敲除，为实验室从分子水平研究类鼻疽伯克霍尔德菌基因功能提供便利；relA基因的缺失可抑制HNBP001的生长、泳动和生物被膜形成。

• 单位
  海南医学院