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摘要
本实验旨在体外构建猪颗粒细胞黄体化模型，为由母猪黄体发育引起的繁殖障碍预防和治疗提供参考。分别采用自然培养法、人绒毛膜促性腺激素（HCG）和胰岛素对猪颗粒细胞进行黄体化处理，通过CCK-8、流式细胞仪、ELISA和QRT-PCR技术检测细胞活力、细胞凋亡率、孕激素含量以及黄体化相关基因的相对表达量，对处理后的黄体化效果进行评估。结果显示：使用5 IU/mL HCG培养猪颗粒细胞2 d和2μg/mL胰岛素培养猪颗粒细胞3 d均可使猪颗粒细胞发生黄体化。在使用2μg/mL胰岛素培养猪颗粒细胞3 d引起黄体化的过程中，其细胞活力和增殖情况良好，孕酮含量显著上升，黄体化相关基因3β-HSD、STAR表达显著下降，CYP11A1表达显著上升，是一种较好的猪颗粒细胞黄体化诱导方法。本研究初步建立了猪颗粒细胞体外黄体化细胞模型，为后续开展颗粒细胞黄体化的机理及其功能研究提供理论参考。
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