干扰ROR1基因表达可抑制骨肉瘤MG-63细胞的上皮-间质转化

作者：王兴文; 移志刚; 赵鑫; 张津; 丁界先; 蒲彦川; 马静琳; 汪静; 王栓科

来源：肿瘤, 2018, 38(03): 173-181.

• 骨肉瘤
• 上皮-间质转化
• RNA干扰
• 受体酪氨酸激酶样孤核受体1

目的:探讨干扰受体酪氨酸激酶样孤核受体1(receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1,ROR 1)基因表达对骨肉瘤MG-63细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法:将特异性靶向ROR 1基因的siRNA(即ROR1-siRNA)转染至ROR1相对高表达的骨肉瘤MG-63细胞中,蛋白质印迹法检测ROR 1基因表达下调情况。然后采用划痕愈合实验及Transwell小室法检测MG-63细胞迁移和侵袭能力的变化,倒置光学显微镜下观察细胞形态的变化。最后,采用蛋白质印迹法和免疫荧光染色法检测MG-63细胞中EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)以及肿瘤转移相关蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白1(zincnger E-box binding homeobox protein 1,ZEB1)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9的表达情况。结果:转染ROR1-siRNA可明显下调骨肉瘤MG-63细胞中ROR1蛋白的表达水平(P<0.05)。下调ROR 1基因表达后,MG-63细胞的迁移和侵袭能力均明显降低(P值均<0.05),细胞形态由间质细胞形向上皮细胞形转变,E-cadherin表达水平明显上调(P<0.05),而vimentin表达水平明显下调(P<0.05),另外ZEB1、MMP-2和MMP-9的表达水平均明显降低(P值均<0.05)。结论:RNA干扰ROR 1基因表达可通过抑制EMT的发生,降低骨肉瘤MG-63细胞的迁移和侵袭能力。

• 单位
  兰州大学第二医院