木犀草素通过调节上皮钠通道影响肺上皮离子转运

作者：刘宏飞; 候亚鹏; 金睿; 周祉妤; 张红蕾; 王琳; 丁炎; 聂宏光^*

来源：中药新药与临床药理, 2020, 31(04): 402-408.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2020.04.006

• 木犀草素
• 肺上皮离子转运
• 上皮Na+通道
• 急性肺损伤
• 环磷酸鸟苷
• 小鼠

目的探究木犀草素(luteolin,Lut)对H441细胞和小鼠肺组织上皮钠通道(epithelial sodium channels,ENaC)的影响及相关机制。方法通过CCK-8毒性实验检测Lut对H441细胞的最佳处理浓度;将生长状态良好的H441细胞分为空白组、脂多糖(LPS)模型组(10μg·mL-1)、Lut组(10μmol·L-1)、Lut+LPS组,将各组进行对应处理后,以Western Blot法检测各组H441细胞α-、γ-ENaC蛋白表达情况;将16只雄性BALB/c小鼠随机分为空白组、LPS模型组(5 mg·kg-1)、Lut组(20 mg·kg-1)、Lut+LPS组,其中LPS模型组和Lut+LPS组用LPS复制急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,模型复制前、后12 h Lut组及Lut+LPS组给予腹腔注射Lut治疗,模型复制24 h后,处死小鼠,取小鼠肺组织及血清,应用组织切片HE染色技术观测ALI小鼠肺组织病理变化以及Lut对其的治疗作用;以Western Blot法检测各组α-、γ-ENaC蛋白在小鼠肺组织中的表达;用ELISA技术检测各组小鼠血清中环磷酸鸟苷(cGMP)蛋白表达的变化。结果 CCK-8实验结果表明,与空白组相比,5、10μmol·L-1Lut能促进H441细胞增殖(P <0.05),但当Lut浓度达到25μmol·L-1后,Lut抑制H441细胞增殖(P <0.01)。组织切片HE染色结果说明,LPS诱导小鼠ALI模型复制成功,Lut能改善ALI模型小鼠肺组织病理变化。Western Blot实验结果表明,与空白组比较,模型组的H441细胞以及小鼠肺组织α-、γ-ENaC蛋白表达均下降(P <0.01);与模型组比较,Lut+LPS组的H441细胞及小鼠肺组织α-、γ-ENaC蛋白表达水平升高(P <0.01)。ELISA结果表明,与空白组比较,LPS能降低小鼠血清中cGMP水平(P <0.01);与模型组比较,Lut+LPS组小鼠血清中cGMP表达水平升高(P <0.01)。结论木犀草素能通过提高急性肺损伤中肺ENaC蛋白表达来调节肺上皮离子转运,其机制可能与调节c GMP水平有关。

• 单位
  中国医科大学; 基础医学院; 宁夏医科大学总医院