摘要

目的 探讨不同EPHX1基因型慢阻肺患者外周血淋巴细胞中mRNA和蛋白的表达水平及外周血抗氧化能力指标的差异。方法 采用病例对照研究的方法,收集昆明医科大学第一附属医院2016年10月至2018年2月门诊和既往住院的220例有吸烟史的稳定期慢阻肺患者(慢阻肺组)及230名健康吸烟者(对照组)外周血,按照BigDye Terminator v1.1 DNA测序试剂盒操作说明进行基因检测。按不同的EPHX1 exon3和exon4的基因多态性可以将EPHX1分为正常活性、慢活性、极慢活性和快活性四种基因活性型。慢阻肺患者按EPHX1基因型及基因活性分为慢活性组(慢及极慢基因活性)和快活性组(正常及快基因活性)。采用qRT-PCR以及western blot检测各组外周血淋巴细胞EPHX1 mRNA和蛋白表达水平,并用相应试剂盒分别测定血清各项抗氧化能力指标。结果 (1)对照组的2-△△Ct为1.000,慢阻肺组的2-△△Ct为1.052±0.023,两组EPHX1基因mRNA表达水平差异无统计学意义(t=1.992,P=0.865)。慢活性组EPHX1基因mRNA表达水平(1.053±0.023)与快活性组(1.048±0.021)比较,差异无统计学意义(t=1.133,P=0.260)。(2)Western blot检测EPHX1蛋白表达水平结果表明,慢阻肺组与对照组EPHX1/GAPDH灰度比值(分别为0.613±0.089和0.602±0.075)差异无统计学意义(t=0.805,P=0.422);慢活性组EPHX1蛋白表达量与快活性组(分别为0.606±0.088和0.622±0.092)相比,差异无统计学意义(t=-0.786P=0.434)。(3)对照组及慢阻肺组各项抗氧化能力指标差异有统计学意义(均P<0.05)。慢活性组和快活性组慢阻肺患者的各项抗氧化能力指标差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 不同EPHX1基因型慢阻肺患者抗氧化能力的不同,可能与EPHX1基因多态性影响了微粒体环氧化水解酶的酶活性有关,而与EPHX1 mRNA和蛋白表达水平无关。