摘要
目的研究一种高效、简捷的直接将人诱导多能干细胞(hiPS)诱导分化为间充质干细胞(MSCs)的方法。方法用MSCs诱导培养基将iPS诱导为MSCs样细胞,倒置显微镜下观察诱导过程中细胞形态的变化,流式细胞术检测iPS及iPS-MSCs表面标志物的表达,RT-PCR检测诱导过程中细胞内NANOG、OCT-4、MSX-1等干性基因表达水平,成骨、成脂、成软骨诱导鉴定其三系分化能力。结果诱导后iPS逐渐向外生长,P4代iPS-MSCs逐渐变为长梭形;CD29、CD44、CD73、CD90、CD105在iPS-MSCs中表达阳性,而CD34、CD45、HLADR则为阴性;iPS在诱导过程中NANOG和OCT-4基因表达逐渐降低,iPS-MSCs不表达NANOG和OCT-4基因,MSX-1基因在诱导第4天即高表达并维持在高水平;iPS-MSCs具有成骨、成脂、成软骨能力。结论成功建立一种高效、简捷的直接将iPS诱导为功能性的MSCs样细胞的方法,为iPS-MSCs进一步的研究与应用提供了技术基础。
- 单位