前列腺素D2对胃癌干细胞增殖、侵袭、凋亡及干性的影响

作者：汪非凡; 王娜; 高培垚; 陈阿敏; 黄岩; 马丽; 汪晶; 许颖; 张强^*

来源：山西医科大学学报, 2022, 53(10): 1203-1211.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2022.10.002

• 胃癌干细胞
• 前列腺素D2
• 增殖
• 侵袭
• 凋亡
• 干性

目的 探讨前列腺素D2(prostaglandins D2,PGD2)对胃癌干细胞(gastric cancer stem cell, GCSC)的调控作用及其机制。方法 将胃癌细胞SGC-7901通过无血清培养法富集GCSC。通过流式细胞术检测SGC-7901和无血清培养富集的GCSC中干性标志物乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)和CD44的阳性率，Western blot检测SGC-7901和无血清培养富集的GCSC中干性标志物锌指蛋白转录因子4(spalt-like transcription factor 4,SALL4)和CD44的蛋白表达以验证富集的GCSC是否满足后续实验需要。将不同浓度的PGD2(2.5,5,7.5,10,15μg/ml)作用于富集的GCSC,通过CCK-8实验检测半数抑制浓度(IC50)作为后续实验PGD2给药浓度。将富集的GCSC分为3组：空白组、DMSO组和PGD2组。通过CCK-8、平板克隆、Transwell实验检测PGD2对GCSC增殖、侵袭能力的影响，流式细胞术检测PGD2对GCSC凋亡能力的影响。通过Western blot技术检测PGD2刺激后，GCSC中侵袭相关蛋白(MMP-2、MMP-9)和凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)、肿瘤干细胞干性标志物(SALL4、CD44)的表达以及JAK2/STAT3通路相关蛋白(磷酸化JAK2、磷酸化STAT3)的调控情况。结果 流式细胞术结果显示与胃癌细胞SGC-7901相比，无血清培养富集的GCSC中干性标志物ALDH1和CD44表达增加(P<0.05),Western blot结果显示无血清培养富集的GCSC中干性标志物SALL4、CD44表达上调(P<0.05),表明GCSC富集成功，满足后续实验需要。CCK-8实验结果显示PGD2对GCSC具有明显的抑制作用，并呈浓度依赖性，PGD2的IC50为8μg/ml,选择PGD2(8μg/ml)作为后续实验条件。CCK-8、平板克隆和Transwell实验表明，与空白组和DMSO组相比，PGD2组GCSC增殖及侵袭能力下降(P<0.01)。流式细胞术结果显示PGD2可促进GCSC凋亡(P<0.05)。另外，Western blot结果显示，与空白组和DMSO组相比，PGD2组MMP-2、MMP-9、CD44、SALL4、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax蛋白表达上调(P<0.05)。此外，与空白组和DMSO组相比，PGD2组磷酸化JAK2、磷酸化STAT3的蛋白水平明显降低(P<0.05),而JAK2、STAT3蛋白水平无明显变化。结论 PGD2可能通过调控JAK2/STAT3通路抑制GCSC增殖、侵袭与干性，促进其凋亡。

• 单位
  蚌埠医学院第一附属医院; 蚌埠医学院; 蚌埠市中医医院