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摘要
目的：探讨芍药苷通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)自噬通路对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的保护作用机制研究。方法：自由饮用4%葡聚糖硫酸钠(DSS)建立UC小鼠模型，56只BALB/c雄性小鼠，随机分为模型组、AMPK抑制剂组(20 mg·kg-1)、芍药苷(50 mg·kg-1)+抑制剂(20 mg·kg-1)组、芍药苷高剂量组(50 mg·kg-1)、中剂量组(25 mg·kg-1)、低剂量组(12.5 mg·kg-1)药物干预7 d后，通过比较小鼠体质量、疾病活动指数(DAI)变化和苏木素-伊红(HE)染色结果判断芍药苷对UC的保护作用。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的水平，免疫荧光检测结肠中微管相关蛋白1轻链3(LC3)的含量，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中AMPK、mTOR蛋白及其磷酸化蛋白p-AMPK、p-mTOR，实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测AMPK、mTOR、苄氯素1(Beclin1)、LC3和螯合体1(p62)的mRNA表达水平。结果：与空白组比较，模型组小鼠体质量下降、DAI评分升高、结肠出现严重的病理学损伤，炎症因子TNF-α、IL-6在血清中含量上升(P<0.01)，LC3和p-AMPK/AMPK在结肠组织中蛋白水平下调，p-mTOR/mTOR蛋白水平上调(P<0.01)；AMPK、Beclin1、LC3的mRNA表达水平上调，mTOR、p62的mRNA表达下调(P<0.01)。与模型组和芍药苷+抑制剂组比较，经芍药苷治疗后小鼠体质量上升、DAI评分降低、结肠组织病理损伤减轻，炎症因子TNF-α、IL-6在血清中含量下降(P<0.05)，LC3和p-AMPK/AMPK在结肠组织中蛋白水平上调，p-mTOR/mTOR蛋白水平下调(P<0.01)，AMPK、Beclin1、LC3的mRNA表达水平下调，mTOR、p62的mRNA表达上调(P<0.01)，抑制剂组小鼠结肠组织病理损伤严重，各项指标趋势与芍药苷高剂量组完全相反。结论：芍药苷可通过激活AMPK/mTOR信号通路，增强自噬，减轻UC小鼠的炎症损伤，从而起到保护作用。
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