摘要
目的探讨中波紫外线照射后不同时间点体外培养的HaCaT细胞MAPK信号通路受调控效应。方法 1.5、4.5、7.5、10、20、30、50 mJ/cm2中波紫外线照射HaCaT细胞后8 h, 对照组细胞除不进行UVB照射外, 其他处理同各剂量UVB组, 蛋白免疫印迹法测定ERK1/2、JNK和p38蛋白表达及磷酸化水平;50 mJ/cm2中波紫外线照射HaCaT细胞, 蛋白免疫印迹法测定照射后2、4、8、12 h 4个时间点, 细胞ERK1/2、JNK和p38蛋白表达及磷酸化水平。使用Quantity One软件计算目的条带吸光度, 以相应蛋白条带的吸光度值与GAPDH蛋白内参条带吸光度值的比值表示相对蛋白含量。结果 7.5、10、20、30、50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后8 h, ERK1/2、JNK磷酸化水平明显上调(P< 0.05), 20、30、50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后p38磷酸化水平上调显著(P< 0.05), 且都在50 mJ/cm2照射后效应最为显著(P< 0.05)。50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后8 h, ERK1/2磷酸化产物水平出现上调, 在处理后的12 h, 与对照组(10.277±0.320)比较, 差异有统计学意义(44.844±2.023, P< 0.05), 而p38和JNK磷酸化产物水平在照射后2 h即开始上调(P< 0.05), 4、8、12 h, p38和JNK与对照相比, UVB照射后虽存在着显著地磷酸化水平差异(P< 0.05), 但随时间推移JNK磷酸化产物水平这种上调的趋势逐渐弱化(P< 0.05)。结论在50 mJ/cm2中波紫外线照射后的HaCaT细胞中, ERK1/2、p38、JNK这3种MAPK信号通路产生了活化效应, 具有一定的时间效应差异。
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单位中国医学科学院北京协和医学院; 苏州大学附属第二医院