黄精皂苷对TGF-β1诱导的HK-2细胞EMT、补体系统和PI3K/AKT/NF-κB信号通路的影响

作者：熊世红; 杨成; 潘德璋; 龚娜

来源：免疫学杂志, 2022, 38(02): 157-163.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20220023

• 转化生长因子-β1
• 肾纤维化
• 上皮-间质转化
• 补体系统
• PI3K/AKT/NF-κB

目的分析黄精皂苷通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路调控补体系统对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的HK-2细胞上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)的影响及机制。方法 HK-2细胞分为4组:对照组、黄精皂苷组、TGF-β1组、TGF-β1+黄精皂苷组。在培养基中加入终质量浓度为10 ng/ml的TGF-β1处理48 h诱导。黄精皂苷终质量浓度为20 ng/ml,培养48 h。检测各组细胞迁移和侵袭的能力,并检测E-钙黏蛋白(E-cad)、N-钙黏蛋白(N-cad)、波形蛋白(Vimentin,Vim)mRNA和蛋白水平评估EMT。通过RT-qPCR和Western blot检测C3aR、C5aR、PI3K、AKT、NF-κB m RNA和蛋白表达量。结果 4组细胞的上述指标比较差异显著(P<0.05)。黄精皂苷组细胞的迁移能力(22.75%±1.98%)、C3aR、C5aR、PI3K、AKT、NF-κB、N-cad、Vim的mRNA和蛋白表达量显著低于对照组,E-cad m RNA和蛋白表达量显著高于对照组(P<0.05)。TGF-β1组细胞的迁移能力(54.88%±4.72%)、C3aR、C5aR、PI3K、AKT、NF-κB、N-cad、Vim的mRNA和蛋白表达量显著高于对照组,E-cad mRNA和蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05)。TGF-β1+黄精皂苷组的迁移能力(36.12%±3.34%)、C3aR、C5aR、PI3K、AKT、NF-κB、N-cad、Vim的m RNA和蛋白表达量显著低于TGF-β1组且显著高于黄精皂苷组,E-cad mRNA和蛋白表达量显著高于TGF-β1组且显著低于黄精皂苷组(P<0.05)。结论黄精皂苷会抑制由TGF-β1引起的肾小管上皮细胞EMT,并抑制PI3K/AKT/NF-κB通路,降低补体相关蛋白C3aR和C5aR的表达。

• 单位
  湖北省中西医结合医院; 武汉科技大学附属天佑医院