高脂血症性急性胰腺炎致胰岛β细胞焦亡的实验研究

作者：吴旭婷; 李昊男; 侯新国^*

来源：中国现代普通外科进展, 2022, 25(06): 426-431.

• 急性胰腺炎
• 高脂血症
• 脂毒性
• 胰岛β细胞
• 焦亡
• 小鼠

目的：探讨高脂血症性急性胰腺炎（HTG-AP）脂毒性对胰岛β细胞的影响和发生机制。方法：棕榈酸（PA）的浓度分别为0、0.15、0.3、0.4和0.5 mmol/L，分别于0、8、16、24、36 h处理小鼠胰岛素瘤细胞（MIN6）。应用Western blot检测GSDMD和GSDME确定最佳刺激浓度和最佳刺激时间，根据此浓度和时间处理MIN6细胞，运用Western blot、CCK8、LDH释放实验、CCK-8法细胞活力测定、ELISA、PI染色和透射电镜检测细胞焦亡的情况。通过si RNA和质粒敲除和过表达NR4A1后用PA处理，运用Western blot、IL-1β ELISA和透射电镜检测细胞焦亡的情况。结果：与对照组相比，GSDMD和GSDME均随着PA浓度和时间的增高表达逐渐增高。选择0.4 mmol/L、36 h作为最佳刺激浓度和时间处理MIN6细胞，处理后GSDMD、GSDMD-N、GSDME、NLRP3、cleaved-Caspase1、cleaved-Caspase3表达及LDH释放和IL-1β较对照组均有升高。CCK-8实验PA组的细胞活力低于对照组。PI染色可见PA组出现红色荧光，电镜可见PA组细胞内出现空泡、细胞膜连续性中断。NR4A1敲除后经PA处理可见GSDMD、GSDMD-N、NLRP3、cleaved-Caspase1、cleaved-Caspase3表达均高于PA组，而过表达NR4A1可挽回这种趋势。ELISA结果显示NR4A1敲除组IL-1β释放要高于PA组，而过表达组则低于PA组。透射电镜结果显示NR4A1敲除组焦亡程度大于PA组，而过表达组则低于PA组。结论：PA可诱导MIN6细胞产生GSDMD介导的焦亡，NR4A1可能参与这一过程。

• 单位
  山东大学; 东南大学附属中大医院; 山东大学齐鲁医院