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摘要
目的 探索神经递质γ-氨基丁酸(GABA)对B细胞分化和抗体生成的影响，为提高疫苗有效性提供新的靶点和策略。方法 流式分选经绵羊红细胞免疫小鼠的脾幼稚B细胞、生发中心B细胞和浆细胞，荧光定量PCR检测GABA A1型受体(Gabra1)和Gabra2、GABA B1型受体(Gabbr1)和Gabbr2、溶质运载蛋白6A家族成员1(Slc6a1)、Slc6a11、Slc6a12和Slc6a13 mRNA表达。建立B细胞体外分化体系，分离小鼠脾B细胞与NB-21饲养层细胞共培养，流式细胞术检测GABA 0.2,1.0和2.0 mmol·L-1对浆细胞分化百分比的影响。每只小鼠ip给予100μg乙酰化4-羟基-3硝基苯基偶联钥孔血蓝蛋白(NP-KLH)和0.1 mL铝佐剂构建经典的抗原免疫小鼠模型，分为免疫+PBS和免疫+GABA组。正常对照组注射0.1 mL双蒸水和0.1 mL铝佐剂。免疫+PBS和免疫+GABA组分别ip给予PBS和GABA 20 mg·kg-1，每天1次，共12 d。第13天流式细胞术分析小鼠脾生发中心B细胞、总浆细胞和IgG1+浆细胞百分比，ELISA检测血清中抗原特异性抗体水平；第27天后流式细胞术分析骨髓中抗原特异性浆细胞百分比。结果 绵羊红细胞免疫小鼠幼稚B细胞、生发中心B细胞和浆细胞均表达Gabbr1。在B细胞体外分化过程中，与细胞对照组相比，GABA1.0和2.0 mmol·L-1处理均显著促进幼稚B细胞向CD138+浆细胞分化(P<0.01)。与正常对照组相比，免疫+PBS组小鼠脾生发中心B细胞百分比增加(P<0.01)，总浆细胞和IgG1+浆细胞百分比增加(P<0.05,P<0.01)；骨髓中抗原特异性浆细胞百分比增加(P<0.01)；血清抗原特异性抗体水平升高(P<0.01)。与免疫+PBS组相比，免疫+GABA组总浆细胞(P<0.01)和IgG1+浆细胞百分比(P<0.05)增加，骨髓中抗原特异性浆细胞百分比增加(P<0.05)，血清抗原特异性抗体水平升高(P<0.01)。结论 神经递质GABA可促进浆细胞分化和高亲和力抗体生成，其在调控B细胞分化过程中发挥重要作用。
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