小鼠大脑皮质星形胶质细胞的培养、鉴定及其TRPC1-7 mRNA的表达

作者：刘阳生

来源：湖北科技学院学报(医学版), 2021, 35(05): 409-461.

DOI：10.16751/j.cnki.2095-4646.2021.05.0409

• 星形胶质细胞
• 体外培养
• TRPC

目的建立有效的星形胶质细胞体外培养体系及检测TRPC1-7 mRNA在其中的表达,为体外研究星形胶质细胞TRPC通道与神经系统疾病的关系奠定基础。方法本实验于无菌条件下取新生小鼠的大脑皮质,经胰酶消化及机械吹打分离细胞,差速贴壁法处理以去除成纤维细胞,用含15%胎牛血清的DF12培养液培养。之后摇床振荡去除小胶质细胞,并以GFAP对星形胶质细胞进行鉴定,PCR检测其中TRPC1-7 mRNA的表达。结果分离培养的细胞有典型的星形胶质细胞形态,并表达GFAP,纯化率95%,且其中TRPC1-7 mRNA均有表达。结论本实验方法可获得符合体外研究要求的星形胶质细胞并有TRPC1-7 mRNA表达,为体外研究星形胶质细胞TRPC通道与神经系统疾病的关系奠定基础。

• 单位
  神经内科; 咸宁市第一人民医院