摘要
目的探究不同强度的脉冲电场(PEF)作用下, 胰腺癌细胞内活性氧(ROS)水平的变化。方法将鼠源胰腺癌细胞Panc02经电场强度分别为0、250、500、750、1 000 V/cm的PEF处理后, 通过流式细胞技术和免疫荧光法, 在体外探究细胞内ROS的生成规律, 并探索不同场强下鼠源和人源胰腺癌细胞凋亡情况。选取20只6~8周龄的雄性C57BL/6 SPF级小鼠制备小鼠原位胰腺癌模型, 分为5组, 每组4只:250 V/cm PEF治疗组、500 V/cm PEF治疗组、750 V/cm PEF治疗组、1 000 V/cm PEF治疗组和假手术组。通过免疫荧光法检测各组小鼠残存肿瘤组织的ROS表达情况。结果在500 V/cm、750 V/cm、1 000 V/cm电场强度作用下, 与作用后2 h相比, 作用6 h、12 h、24 h、48 h后细胞内ROS表达阳性的细胞比例均降低, 差异均具有统计学意义(均P<0.05)。与0 V/cm PEF处理相比, 500 V/cm及750 V/cm PEF处理后的Panc02细胞的ROS均增加, 差异具有统计学意义(均P<0.05);与相同作用时间下250 V/cm PEF处理相比, 电场强度为500 V/cm和750 V/cm时Panc02细胞中ROS的表达水平均增加, 差异具有统计学意义(均P<0.05)。Panc02细胞和MIA-PaCa-2细胞凋亡比例均随场强的增高而增加, 并在场强为750 V/cm时, 肿瘤细胞凋亡比例达到峰值。与假手术组相比, 在500 V/cm PEF治疗组(16.65±6.01比2.38±1.21, t=-6.53)和750 V/cm PEF治疗组(16.54±4.41比2.38±1.21, t=-6.48)小鼠胰腺癌组织中ROS的表达量增加, 差异均具有统计学意义(均P<0.001)。结论 PEF处理能够增加胰腺癌细胞及组织内ROS水平, 当电场强度为500及750 V/cm时, ROS产生较多。
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单位西安交通大学第一附属医院